引言

　　【JD-ZW108】，山東競(jìng)道光電，以客戶(hù)為中心，以品質(zhì)為根本，攜手共進(jìn)，共贏未來(lái)。非洲豬瘟對(duì)全q養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大沖擊，準(zhǔn)確檢測(cè)是防控疫情的關(guān)鍵。非洲豬瘟檢測(cè)儀以樣本無(wú)損檢測(cè)為特色，為保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性提供了可靠支持，在非洲豬瘟防控體系中扮演著重要角色。

　　一、非洲豬瘟檢測(cè)儀的工作原理與結(jié)構(gòu)

　　(一)工作原理

　　基于分子生物學(xué)的檢測(cè)原理：多數(shù)非洲豬瘟檢測(cè)儀采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)及其衍生方法。非洲豬瘟病毒含有特定的核酸序列，PCR 技術(shù)以病毒核酸為模板，在引物的引導(dǎo)下，通過(guò) DNA 聚合酶對(duì)目標(biāo)核酸片段進(jìn)行擴(kuò)增。經(jīng)過(guò)多輪循環(huán)，極微量的病毒核酸被擴(kuò)增到可檢測(cè)水平。例如，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(qPCR)技術(shù)，在 PCR 反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物，隨著核酸擴(kuò)增，熒光信號(hào)強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物量成正比，通過(guò)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)，不僅能判斷樣本中是否存在非洲豬瘟病毒，還能精確測(cè)定病毒核酸含量。

　　免疫檢測(cè)原理：部分檢測(cè)儀運(yùn)用免疫檢測(cè)原理，基于抗原 - 抗體的特異性結(jié)合。非洲豬瘟病毒的蛋白質(zhì)外殼具有特定的抗原決定簇，將樣本與含有特異性抗體的試劑反應(yīng)，如果樣本中存在非洲豬瘟病毒，抗原與抗體就會(huì)結(jié)合形成復(fù)合物。通過(guò)標(biāo)記物，如酶標(biāo)記、熒光標(biāo)記等，使這種結(jié)合以可見(jiàn)的方式呈現(xiàn)，如顏色變化或熒光信號(hào)，從而判斷樣本是否為陽(yáng)性。

　　(二)儀器結(jié)構(gòu)

　　樣本處理單元：樣本處理單元負(fù)責(zé)對(duì)采集的樣本進(jìn)行初步處理，以便后續(xù)檢測(cè)。它通常配備研磨、裂解、離心等設(shè)備。對(duì)于組織樣本，通過(guò)研磨將其破碎，釋放細(xì)胞內(nèi)容物;裂解液進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜和核膜，使核酸或病毒抗原釋放出來(lái);離心則去除雜質(zhì)，得到較為純凈的樣本提取物。例如，對(duì)于血液樣本，離心后可分離出血清或血漿，用于后續(xù)檢測(cè)。

　　檢測(cè)反應(yīng)單元：這是檢測(cè)儀的核心部分，不同檢測(cè)原理的儀器，其檢測(cè)反應(yīng)單元有所不同。基于 PCR 技術(shù)的儀器，檢測(cè)反應(yīng)單元包含高精度的溫控系統(tǒng)，能精準(zhǔn)控制 PCR 反應(yīng)所需的變性、退火和延伸溫度。反應(yīng)腔則為核酸擴(kuò)增提供穩(wěn)定的環(huán)境，確保反應(yīng)順利進(jìn)行。免疫檢測(cè)儀器的反應(yīng)單元?jiǎng)t設(shè)有反應(yīng)板或反應(yīng)管，用于容納樣本與試劑，使抗原 - 抗體反應(yīng)充分發(fā)生。

　　檢測(cè)分析單元：檢測(cè)分析單元負(fù)責(zé)對(duì)檢測(cè)反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行分析和呈現(xiàn)。PCR 檢測(cè)儀器通過(guò)熒光信號(hào)探測(cè)器捕捉熒光強(qiáng)度變化，利用數(shù)據(jù)分析軟件，根據(jù)預(yù)設(shè)的閾值和標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，計(jì)算樣本中病毒核酸含量，并生成檢測(cè)報(bào)告，直觀顯示檢測(cè)結(jié)果。免疫檢測(cè)儀器通過(guò)檢測(cè)標(biāo)記物的信號(hào)，如酶標(biāo)儀檢測(cè)酶促反應(yīng)產(chǎn)生的顏色變化，或熒光顯微鏡觀察熒光標(biāo)記的抗原 - 抗體復(fù)合物，判斷樣本是否含有非洲豬瘟病毒抗原。

　　數(shù)據(jù)存儲(chǔ)與傳輸單元：該單元用于存儲(chǔ)檢測(cè)數(shù)據(jù)，并支持?jǐn)?shù)據(jù)傳輸。它具備一定容量的數(shù)據(jù)存儲(chǔ)功能，可記錄每次檢測(cè)的樣本信息、檢測(cè)時(shí)間、檢測(cè)結(jié)果等詳細(xì)數(shù)據(jù)。同時(shí)，通過(guò)有線(xiàn)或無(wú)線(xiàn)通信模塊，如以太網(wǎng)接口、Wi - Fi、藍(lán)牙等，將數(shù)據(jù)傳輸?shù)诫娔X、服務(wù)器或云端，便于數(shù)據(jù)管理、統(tǒng)計(jì)分析和遠(yuǎn)程監(jiān)控。

　　二、樣本無(wú)損檢測(cè)的實(shí)現(xiàn)方式

　　(一)非侵入式樣本采集

　　唾液樣本采集：一些非洲豬瘟檢測(cè)儀支持唾液樣本采集。使用特制的唾液采集裝置，如柔軟的拭子或唾液收集器，輕輕放入豬的口腔，采集唾液樣本。這種方式對(duì)豬體無(wú)損傷，豬只應(yīng)激反應(yīng)小，且操作簡(jiǎn)便快捷。采集后的唾液樣本可直接用于檢測(cè)，避免了傳統(tǒng)采血等侵入式采集方法可能帶來(lái)的感染風(fēng)險(xiǎn)和豬只不適。

　　鼻腔拭子采集：通過(guò)使用無(wú)菌鼻腔拭子，輕柔地插入豬的鼻腔，旋轉(zhuǎn)拭子獲取鼻腔分泌物樣本。鼻腔拭子采集同樣屬于非侵入式采集，能有效減少對(duì)豬只的傷害，且采集的樣本中可能含病毒顆粒或抗原，可用于后續(xù)檢測(cè)。這種采集方式相對(duì)簡(jiǎn)單，對(duì)操作人員要求不高，適合在養(yǎng)殖場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行大規(guī)模樣本采集。

　　(二)溫和樣本處理

　　物理處理方式：在樣本處理過(guò)程中，采用溫和的物理處理方式。例如，對(duì)于組織樣本的研磨，使用輕柔的研磨設(shè)備，避免過(guò)度研磨導(dǎo)致樣本結(jié)構(gòu)破壞和核酸降解。對(duì)于液體樣本，如血液或唾液，通過(guò)低速離心等方式去除雜質(zhì)，而不采用劇烈的離心力，防止對(duì)樣本中的病毒核酸或抗原造成損傷。

　　化學(xué)試劑的選擇：選擇對(duì)樣本成分影響較小的化學(xué)試劑。在核酸提取過(guò)程中，采用溫和的裂解液，既能有效裂解細(xì)胞釋放核酸，又能保護(hù)核酸的完整性。在免疫檢測(cè)中，使用的抗體試劑具有高特異性和親和力，不會(huì)對(duì)病毒抗原造成破壞，確保抗原 - 抗體反應(yīng)的準(zhǔn)確性。

　　三、樣本無(wú)損檢測(cè)保障結(jié)果準(zhǔn)確的原因

　　(一)保持樣本生物活性

　　核酸完整性：無(wú)損檢測(cè)方式能保持樣本中病毒核酸的完整性。在 PCR 檢測(cè)中，完整的核酸是準(zhǔn)確擴(kuò)增和檢測(cè)的基礎(chǔ)。如果核酸在采集或處理過(guò)程中發(fā)生斷裂或降解，可能導(dǎo)致擴(kuò)增失敗或出現(xiàn)假陰性結(jié)果。通過(guò)非侵入式采集和溫和處理，減少了核酸受損的可能性，從而保障檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　抗原穩(wěn)定性：對(duì)于免疫檢測(cè)，無(wú)損檢測(cè)確保了病毒抗原的穩(wěn)定性?？乖目臻g結(jié)構(gòu)和活性決定了其與抗體的結(jié)合能力。如果抗原在樣本處理過(guò)程中發(fā)生變性或結(jié)構(gòu)改變，可能無(wú)法與抗體特異性結(jié)合，導(dǎo)致假陰性結(jié)果。溫和的樣本處理方式有助于維持抗原的穩(wěn)定性，保證免疫檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

　　(二)減少外界干擾

　　避免樣本交叉污染：非侵入式樣本采集減少了樣本之間交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。傳統(tǒng)侵入式采集方法，如采血時(shí)，如果操作不當(dāng)，可能導(dǎo)致不同豬只樣本之間的交叉污染，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。而唾液或鼻腔拭子采集，每個(gè)樣本獨(dú)立采集，且采集工具一次性使用，有效避免了交叉污染。

　　降低雜質(zhì)干擾：溫和的樣本處理方式能有效去除雜質(zhì)，同時(shí)減少雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾。在樣本處理過(guò)程中，通過(guò)合理的離心、過(guò)濾等步驟，去除樣本中的細(xì)胞碎片、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)。這些雜質(zhì)可能會(huì)抑制 PCR 反應(yīng)或干擾免疫檢測(cè)中的抗原 - 抗體反應(yīng)，影響檢測(cè)結(jié)果。無(wú)損檢測(cè)方式在去除雜質(zhì)的同時(shí)，保留樣本中的目標(biāo)檢測(cè)物，提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　四、樣本無(wú)損檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)及應(yīng)用場(chǎng)景

　　(一)對(duì)豬只健康和養(yǎng)殖生產(chǎn)的影響

　　降低豬只應(yīng)激：樣本無(wú)損檢測(cè)方式對(duì)豬只應(yīng)激小，有利于豬只的健康養(yǎng)殖。應(yīng)激可能導(dǎo)致豬只免疫力下降，增加其他疾病的感染風(fēng)險(xiǎn)。采用非侵入式采集，如唾液采集，豬只幾乎不會(huì)產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，能保持正常的生理狀態(tài)，有助于提高豬只的抗病能力和生長(zhǎng)性能。

　　保障養(yǎng)殖生產(chǎn)秩序：無(wú)損檢測(cè)避免了因侵入式檢測(cè)可能導(dǎo)致的豬只受傷或感染，保障了養(yǎng)殖生產(chǎn)的正常秩序。例如，采血檢測(cè)可能導(dǎo)致豬只皮膚破損，容易引發(fā)感染，影響豬只生長(zhǎng)。而無(wú)損檢測(cè)方式可確保豬只在檢測(cè)過(guò)程中不受傷害，維持養(yǎng)殖生產(chǎn)的穩(wěn)定進(jìn)行。

　　(二)在非洲豬瘟防控中的應(yīng)用場(chǎng)景

　　養(yǎng)殖場(chǎng)日常監(jiān)測(cè)：養(yǎng)殖場(chǎng)可定期使用無(wú)損檢測(cè)的非洲豬瘟檢測(cè)儀對(duì)豬只進(jìn)行監(jiān)測(cè)。通過(guò)采集唾液或鼻腔拭子樣本，快速檢測(cè)豬只是否感染非洲豬瘟病毒。這種方式操作簡(jiǎn)便，可在豬舍內(nèi)就地進(jìn)行，無(wú)需將豬只轉(zhuǎn)移到特定檢測(cè)地點(diǎn)，提高了監(jiān)測(cè)效率。

　　運(yùn)輸檢疫：在生豬運(yùn)輸過(guò)程中，可采用無(wú)損檢測(cè)的檢測(cè)儀對(duì)運(yùn)輸?shù)呢i只進(jìn)行檢疫。在運(yùn)輸車(chē)輛?？奎c(diǎn)，通過(guò)采集唾液或鼻腔拭子樣本，快速判斷豬只是否感染非洲豬瘟病毒，防止疫情通過(guò)運(yùn)輸環(huán)節(jié)傳播。

　　屠宰場(chǎng)檢疫：在屠宰場(chǎng)，對(duì)入場(chǎng)生豬進(jìn)行無(wú)損檢測(cè)，可及時(shí)發(fā)現(xiàn)感染豬只，防止病豬肉流入市場(chǎng)。同時(shí)，對(duì)于屠宰后的豬肉產(chǎn)品，也可通過(guò)采集表面拭子樣本進(jìn)行檢測(cè)，確保上市豬肉的安全。

　　五、應(yīng)用案例與成效

　　(一)案例詳情

　　某大型養(yǎng)豬場(chǎng)，存欄生豬數(shù)量眾多。以往采用傳統(tǒng)采血檢測(cè)非洲豬瘟，不僅操作繁瑣，而且豬只應(yīng)激反應(yīng)大，部分豬只因采血感染其他疾病，影響生長(zhǎng)。為改善檢測(cè)狀況，該養(yǎng)豬場(chǎng)引入樣本無(wú)損檢測(cè)的非洲豬瘟檢測(cè)儀，采用唾液采集方式進(jìn)行日常監(jiān)測(cè)。

　　(二)顯著成效

　　引入檢測(cè)儀后，養(yǎng)豬場(chǎng)的檢測(cè)效率大幅提高。唾液采集操作簡(jiǎn)單，每個(gè)樣本采集時(shí)間不超過(guò) 1 分鐘，且可同時(shí)對(duì)多頭豬只進(jìn)行采集。檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，及時(shí)發(fā)現(xiàn)了多例潛在感染豬只，通過(guò)及時(shí)隔離和處理，有效防止了疫情在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)的傳播。豬只因檢測(cè)產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)幾乎消失，豬只健康狀況明顯改善，生長(zhǎng)速度加快，養(yǎng)殖場(chǎng)的經(jīng)濟(jì)效益得到保障。同時(shí)，在運(yùn)輸檢疫和屠宰場(chǎng)檢疫環(huán)節(jié)應(yīng)用該檢測(cè)儀，也有效阻止了非洲豬瘟病毒的傳播，保障了豬肉產(chǎn)品的安全。

　　六、結(jié)語(yǔ)

　　非洲豬瘟檢測(cè)儀的樣本無(wú)損檢測(cè)特性，從保持樣本生物活性和減少外界干擾等方面，為準(zhǔn)確檢測(cè)非洲豬瘟提供了有力保障。在實(shí)際應(yīng)用中，它不僅有利于豬只健康和養(yǎng)殖生產(chǎn)，還在非洲豬瘟防控的各個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮著重要作用。隨著技術(shù)的不斷發(fā)展，樣本無(wú)損檢測(cè)技術(shù)將更加完善，為非洲豬瘟防控工作做出更大貢獻(xiàn)。